微生物檢驗(yàn)實(shí)習(xí)心得體會(huì)
當(dāng)我們對(duì)人生或者事物有了新的思考時(shí)，寫心得體會(huì)是一個(gè)不錯(cuò)的選擇，這樣就可以總結(jié)出具體的經(jīng)驗(yàn)和想法。那么問題來了，應(yīng)該如何寫心得體會(huì)呢？下面是小編為大家整理的微生物檢驗(yàn)實(shí)習(xí)心得體會(huì)，希望對(duì)大家有所幫助。
大三下學(xué)期5月份，我們動(dòng)物檢疫專業(yè)的同學(xué)開始了為期2個(gè)多月的教學(xué)實(shí)習(xí)，在眾多輔導(dǎo)老師之中，我有幸跟隨我校動(dòng)物科技學(xué)院預(yù)防系的趙宇軍教授進(jìn)行學(xué)習(xí)。實(shí)習(xí)的地點(diǎn)就在我校動(dòng)科樓的微生物實(shí)驗(yàn)室，以前我們?cè)谶@里上過實(shí)驗(yàn)課，所以并不陌生。這次大家來到實(shí)驗(yàn)室為自行選擇課題進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作，我對(duì)世界聞名的金黃色葡萄球菌非常感興趣，在老師的帶領(lǐng)下進(jìn)行了相關(guān)食物中該菌的檢驗(yàn)。下面我們來回顧這次實(shí)驗(yàn)。
一、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：食品中金黃葡萄球菌的檢測(cè)方法
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
金黃色葡萄球菌是一種引起人類和動(dòng)物化膿感染的重要致病菌，也是造成人類食物中毒的常見致病菌之一。本菌廣泛分布于自然界，如空氣、土壤、水及其它環(huán)境中。在人類和動(dòng)物的皮膚及外界相通的腔道中，也經(jīng)常有本菌存在。據(jù)報(bào)導(dǎo)，在正常人群中的帶菌率可達(dá)30%~80%，其中皮膚帶菌率為8~22%，鼻腔和咽喉部等上呼吸道的帶菌率在40~50%以上，因此其可通過各種途徑和方式，尤其是經(jīng)工作人員的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黃葡萄球菌能產(chǎn)生腸毒素，故一旦細(xì)菌污染食品，并在合適的溫度環(huán)境下，細(xì)菌可以大量繁殖并產(chǎn)生腸毒素，從而引起消費(fèi)者食物中毒。由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒，在世界各國都極為普遍。特別是在北美及歐洲等地區(qū)發(fā)病率更高。在上述這些國家中，每年有金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例，僅次于沙門氏菌，而在細(xì)菌性食物中毒病例排到第2~3位，有此而造成的經(jīng)濟(jì)損失也相當(dāng)慘重，在我國由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例也時(shí)有報(bào)導(dǎo)，所以.
目前世界各國都把金黃色葡萄球菌列為食品衛(wèi)生的法定檢測(cè)項(xiàng)目。我國對(duì)金黃色葡萄球菌目前采用的方法是以國家標(biāo)準(zhǔn)GB.4789-10-84及檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN.0172-92作為依據(jù)。
整個(gè)檢測(cè)過程獲得最終結(jié)果須時(shí)5天左右，既費(fèi)時(shí)又費(fèi)力，并造成貨物積壓，也影響貨物的及時(shí)出運(yùn)，并使貨主的倉儲(chǔ)成本提高，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。多年來很多食品微生物實(shí)驗(yàn)室都在探索和尋找一些準(zhǔn)確性高，并快速的檢測(cè)方法，最近我們分別從美國3M公司和法國生物梅里埃公司獲得兩種快速檢測(cè)致病性金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基，其名稱為：①PetrifilmRS
A.CountPlate(由美國3M公司研制生產(chǎn))，是一種薄膜型快速檢測(cè)金黃色葡萄球菌的計(jì)數(shù)平板。②Baird-parker+RPFAgar.(由法國生物梅里埃公司研制生產(chǎn)的用Baird-Parker瓊脂加免血漿纖維蛋白原的金黃色葡萄球菌檢測(cè)計(jì)數(shù)平板)。
二、實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：原理Petrifilm.RS
A.測(cè)試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養(yǎng)基片，此培養(yǎng)基中含有經(jīng)修正的Barid-Parker，營養(yǎng)成分加上以冷水可溶解的膠質(zhì)。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應(yīng)片，含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計(jì)數(shù)及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產(chǎn)毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐熱，在100℃加熱30min，不易喪失活性，在130℃之下，其D值為16.6min，此酶之分子量為16800，等電點(diǎn)PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測(cè)血漿凝固酶相似，是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法，在Petrifilm.RSA檢測(cè)片上，耐熱DNA酶反應(yīng)看起來，呈粉紅色環(huán)帶包圍著一個(gè)紅色或蘭色的菌落。Petrifilm.RSA檢測(cè)片，必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應(yīng)片一起使用，單獨(dú)使用
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A.測(cè)試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養(yǎng)基片，此培養(yǎng)基中含有經(jīng)修正的Barid-Parker，營養(yǎng)成分加上以冷水可溶解的膠質(zhì)。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應(yīng)片，含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計(jì)數(shù)及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產(chǎn)毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐熱，在100℃加熱30min，不易喪失活性，在130℃之下，其D值為16.6min，此酶之分子量為16800，等電點(diǎn)PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測(cè)血漿凝固酶相似，是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法，在Petrifilm.RSA檢測(cè)片上，耐熱DNA酶反應(yīng)看起來，呈粉紅色環(huán)帶包圍著一個(gè)紅色或蘭色的菌落。Petrifilm.RSA檢測(cè)片，必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應(yīng)片一起使用，單獨(dú)使用將不會(huì)顯示菌落，因?yàn)榫哂休o助計(jì)數(shù)菌落的指示劑是在反應(yīng)片上，而不是在Petrifilm.RSA檢測(cè)片上。Baird-parker+RPFagar，這一培養(yǎng)基中含有豐富的營養(yǎng)成分，其中以氯化鋰代替亞碲酸鉀，使菌落顏色呈黑色，RPF補(bǔ)充有兔血漿和牛纖維蛋白原，以便檢測(cè)凝固酶活力，胰酶可以抑制全部或部分圍繞凝固酶陽性菌落周圍沉淀暈環(huán)纖維蛋白的溶解，因此凡存在血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌，將在培養(yǎng)基中呈現(xiàn)有暈環(huán)的黑色菌落，即可確認(rèn)，并作計(jì)數(shù)。
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